骨髓内皮祖细胞治疗大鼠急性脑缺血的实验研究

【摘要】脑卒中是神经系统最常见的疾病，严重地危害人类的健康。脑卒中血管受损时，EPCs能够选择性迁移并聚集在受损或缺血组织区形成血管。EPCs在心脑及肝肾等多种缺血性疾病中的研究日益增多，已成为研究热点。目的：本研究旨在将大鼠骨髓内皮祖细胞注入大鼠急性脑缺血再灌注模型，探讨EPCs在急性脑缺血疾病治疗中的作用。方法：采用密度梯度离心联合贴壁筛选法从Wistar大鼠骨髓分离获得单个核细胞（MNC），进行诱导培养，观察、记录细胞的生物学特征；选取EPCs特异性表面标志CD34、KDR对原代细胞进行免疫荧光检测。使用线栓法制备Wistar大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型。取体重250-300g健康成年雄性Wistar大鼠60只，随机分3组：假手术组12只（A组），PBS治疗组20只（B组），EPCs治疗组28只（C组）（移植EPCs后1d、3d、7d、14d取材，共4个检测时间点）。（1）大鼠术后行神经行为学评分，1～3分者入选后续实验。（2）TTC染色观察脑梗死范围。（3）HE染色观察脑组织病理学变化。（4）免疫组化法测定大鼠各个时间点VEGF、FGF-2的表达。显微镜下观察、记录阳性表达情况。运用SPSS17.0软件行统计学分析。结果：(1)成功从大鼠骨髓分离并培养了内皮祖细胞(2)贴壁细胞表面CD34、KDR免疫荧光表达阳性(3)成功制备了大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。(4)神经行为学评分：C组评分明显低于B组，治疗7天后评分差异更明显。(5)TTC染色脑梗死体积：C组梗死体积明显小于B组，有统计学差异（P<0.05）。(6)VEGF、FGF-2的表达：C组VEGF和FGF-2表达明显增高，与其他两组相比均有统计学差异（P<0.01）结论：（1）可以从大鼠骨髓分离获得EPCs，成功在体外培养并进行鉴定，为缺血性脑血管病治疗提供基础。（2）EPCs在急性缺血性脑卒中治疗中有较好的疗效，能促进新生血管形成，挽救缺血半暗带，减小梗死体积，明显改善神经损伤，促进神经功能恢复。
【作者】王丽亚；
【导师】刘亢丁；
【作者基本信息】吉林大学，神经病学，2014，硕士
【关键词】内皮祖细胞；脑缺血；血管内皮生长因子；成纤维细胞生长因子-2；

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